Ksantoproteinovaya reactie op eiwitten: tekenen en formulevergelijking

Om de kwalitatieve samenstelling van veel voedingsmiddelen gebruikt ksantoproteinovaya reactie op het eiwit vast te stellen. De aanwezigheid van aromatische aminozuren in het mengsel verandert in een positieve testmonster kleur.

Wat is eiwit

Het is ook wel een eiwit, dat is een bouwstof voor het levende lichaam. Eiwitten behouden spiermassa, het herstel van de gewonde en dode weefsel structuren van verschillende organen, of het haar, huid en ligamenten. Met hun deelname, produceert rode bloedlichaampjes, wordt beheerst door de normale werking van veel hormonen en het immuunsysteem.

Dit is een complex molecuul dat een polypeptide met een massa van meer dan 6 ~ 10 ³ dalton. Eiwitstructuur vormen van aminozuurresiduen in een groot aantal gekoppelde peptidebinding.

De structuur van proteïnen

Kenmerkend voor deze stoffen tegen peptiden met laag molecuulgewicht is dat zij ontwikkelden een driedimensionale ruimtelijke structuur, bewezen werking met een verschillende mate van aantrekking. Eiwitten hebben vier-structuur. Voor elk van hen heeft zijn eigen kenmerken.

Als basis van de primaire organisatie van de moleculen afgeleide aminozuursequentie structuur die ksantoproteinovaya reactie op het eiwit herkent. Deze structuur is een periodiek herhalende peptidebinding -HN-CH-CO-, een selectief deel radicalen zijn de zijketens van aminozuren. Ze definiëren verdere eigenschappen van de stof als geheel.

De primaire eiwitstructuur sterk genoeg geacht dit te wijten aan de aanwezigheid van sterke covalente interacties in peptidebindingen. De vorming van verdere niveaus plaatsvindt afhankelijk van de in de eerste fase kenmerken.

De vorming van de secundaire structuur mogelijk door het verdraaien van de aminozuursequentie in een spiraal, waarbij waterstofbindingen worden vastgesteld tussen de windingen.

Tertiair organisatie van moleculen gevormd door een van een spiraalvormige anderzijds fragmenten met het optreden van alle mogelijke verbindingen daartussen, met waterstof, disulfide, covalente of ionische verbinding. Het resultaat is de vereniging in de vorm van bolletjes.

De ruimtelijke opstelling van de tertiaire structuren met de vorming van chemische bindingen daartussen leidt tot de vorming van de uiteindelijke vorm van het molecuul of quaternaire niveaus.

aminozuren

Ze zorgen ervoor dat de chemische eigenschappen van eiwitten. Er zijn ongeveer 20 belangrijke aminozuren die de polypeptiden in een andere volgorde. Dit ook wel zeldzaam aminocarbonzuur in de vorm hydroxyproline en hydroxylysine afgeleide basische peptide.

Als herkenningsteken ksantoproteinovaya eiwit reactie, de aanwezigheid van bepaalde aminozuren verschaft de kleurverandering van reagentia, wat suggereert dat de aanwezigheid van specifieke structuren samenstelling.

Als het bleek, zijn het carbonzuren die substitutie van waterstofatoom hebben plaatsgevonden op de aminogroep.

Een voorbeeld structuur van het molecuul kunnen dienen structuurformule glycine (HNH- HCH- COOH) als het eenvoudigste aminozuur.

In dit geval is één van de waterstofatomen _CH2 - kan worden vervangen door een koolstofatoom langere groep omvattende een benzeenring, amino, sulfo, carboxy.

Wat doet ksantoproteinovaya reactie

Kwalitatieve analyse van eiwitten met behulp van verschillende technieken. Deze omvatten reacties:

• biureet met de verschijning van paarse kleur;
• ninhydrine een blauw-violette oplossing;
• formaldehyde met de oprichting van een rode kleur;
• Nogier om de grijs-zwarte kleur neer te slaan.

Bij de uitvoering van elke methode bleek de aanwezigheid van eiwitten en de aanwezigheid van bepaalde functionele groepen in het molecuul.

Er ksantoproteinovaya reactie op het eiwit. Het wordt ook wel de afbraak Mulder. Het verwijst naar de kleurreacties voor eiwitten, waarin aromatische en heterocyclische aminozuren.

Een kenmerk van een dergelijk monster werkwijze nitrering salpeterzuur cyclische aminozuurresten met name de toetreding van de nitrogroep aan de benzeenring.

Het resultaat van deze werkwijze is de vorming van nitroverbindingen, dat neersloeg. Dit is het basiskenmerk ksantoproteinovaya reactie.

Wat bepaald aminozuur

Niet alle aminocarbonzuur kan worden gedetecteerd met behulp van een dergelijk monster. Het belangrijkste kenmerk van ksantoproteinovaya proteïnedetectie reactie - de aanwezigheid van de benzeenring of heterocyclische ring in het molecuul aminozuren.

Omdat het eiwit wordt geïsoleerd uit aminocarbonzuren twee aromatische, waarin een fenylgroep (fenylalanine), en een hydroxyfenylgroep voorstelt (tyrosine).

Met ksantoproteinovaya reactie wordt bepaald heterocyclisch aminozuur tryptofaan, indol met een aromatische kern. De aanwezigheid van de bovengenoemde verbindingen in het eiwit geeft de karakteristieke kleurverandering van de testomgeving.

Wat gebruik reagentia

Voor het uitvoeren van de reactie ksantoproteinovaya zou een 1% oplossing van ei-eiwit of plantaardige oorsprong te bereiden.

Gewoonlijk gebruikt ei, dat verdeeld voor verdere scheiding van het eiwit uit de dooier. Voor een 1% oplossing van eiwit werd verdund in een tienvoudige hoeveelheid gezuiverd water. Na oplossen van het resulterende eiwit vloeistof moet worden gefilterd door verschillende lagen kaasdoek. Deze oplossing moet worden bewaard op een koele plaats.

Het is mogelijk de reactie met een plantaardig eiwit uit te voeren. Het bereiden wordt gebruikt tarwemeel in een hoeveelheid van 0,04 kg. 0,16 liter gezuiverd water. De bestanddelen werden gemengd in een kolf die is gebonden gedurende 24 uur op een koele plaats bij een temperatuur van ongeveer + 1 ° C Aan het eind van de dag werd de oplossing geroerd, gevolgd door filtratie ervan eerst met watten en - een papieren vouwfilter. De verkregen vloeistof werd in een koele plaats gehouden. Deze oplossing is voornamelijk aanwezig in de albuminefractie.

Voor het uitvoeren van de reactie ksantoproteinovaya als voornaamste gebruikte reagens salpeterzuur conc. Verder reagens is een oplossing van 10% natriumhydroxide of ammoniak, de gelatineoplossing en geconcentreerd fenol.

De methodiek van de

In een schone buis gedaan 1% eiwitoplossing -de eieren of bloem in een hoeveelheid van 2 ml. Hieraan wordt ongeveer 9 druppels geconcentreerd salpeterzuur flocculatie gestopt. Het verkregen mengsel werd verwarmd, verkregen gele neerslag langzaam verdwijnt en de kleur in oplossing gaat.

Tijdens het afkoelen in de buis langs de wand toegevoegd ongeveer 9 druppels natriumhydroxide, geconcentreerd, wat risico voor het proces. Het reactiemedium wordt basisch. Content wordt oranje kleur in de reageerbuis.

kenmerken van

Aangezien ksantoproteinovaya kwalitatieve reactie salpeterzuur opgeroepen door de werking van de eiwitten wordt het monster uitgevoerd onder inbegrepen zuurkast. Alle veiligheidsmaatregelen in acht bij het werken met geconcentreerde bijtende stoffen.

De afgifte van de inhoud van de buis kan optreden tijdens het verwarmingsproces die moeten worden overwogen bij het vaststellen in een houder en het selecteren van de helling.

Kiezen van geconcentreerd salpeterzuur en bijtende soda mag alleen met een glazen pipet en peren rubber verboden mond pipetteren.

Relatieve reactie met fenol

Voor de duidelijkheid proces en bevestiging van de aanwezigheid van de fenylgroepen is uitgevoerd met een soortgelijk monster hydroxybenzeen uitgevoerd.

De buis die 2 ml verdund fenol, daarna geleidelijk langs de wand, werd 2 ml geconcentreerd salpeterzuur toegevoegd. De oplossing werd onderworpen aan een verhitting, waardoor het geel wordt. Deze reactie is de kwaliteit van de aanwezigheid van de benzeenring.

Werkwijze hydroxybenzeen genitreerd met salpeterzuur, gevolgd door vorming van een mengsel van p-nitrofenol en o-nitrofenol in een percentage van 15-35.

vergelijkingsproef met gelatine

Om te bewijzen dat ksantoproteinovaya reactie op het eiwit onthult een aminozuur met een aromatische structuur, gebruikt eiwitten die geen fenolische groepen hebben.

In een schone buis gedaan 1% gelatine-oplossing in een hoeveelheid van 2 ml. Hieraan wordt ongeveer 9 druppels geconcentreerd salpeterzuur. Het resulterende mengsel wordt verwarmd. De oplossing werd gekleurd in geel, wat de afwezigheid van aminozuren met een aromatische structuur blijkt. Soms is er een lichte vergeling van het milieu als gevolg van de aanwezigheid van eiwit verontreinigingen.

reactievergelijkingen

In de tweestaps reactie verloopt ksantoproteinovaya eiwitten. Formule eerste trap nitreringswerkwijze beschrijft aminozuurmoleculen met geconcentreerd salpeterzuur.

Een voorbeeld is de bevestiging van de nitrogroep tot het tyrosine nitrotyrosine en dinitrotirozina vormen. In het eerste geval de benzeenring één _NO2 rest draagt bevestigd, en de tweede verbinding twee waterstofatomen vervangen door _NO2. Chemische formule ksantoproteinovaya tyrosine reactie voorgesteld door reactie met salpeterzuur tot nitrotyrosine molecuul.

Nitratie gaat gepaard met de overgang kleurloze kleuring in gele tint. Bij het uitvoeren van deze reactie met eiwitten die de aminozuurresidu fenylalanine of tryptofaan en de kleur van de oplossing verandert.

De tweede stap het reactieproduct van nitrering van tyrosinemoleculen bijzonder nitrotyrosine, met ammoniumhydroxide of natriumhydroxide. Het resultaat is een natrium- of ammoniumzout, waarbij de geel-oranje kleur. Een dergelijke reactie is gerelateerd aan de mogelijkheid nitrotyrosine moleculen bewegen in de chinoïde vorm. Vervolgens zout daarvan Nitronic zuur, dat een chinonsysteem geconjugeerde dubbele bindingen heeft gevormd.

Aldus eindigt ksantoproteinovaya reactie op eiwitten. De vergelijking hierboven gepresenteerde tweede stap.

uitslagen

Bij de analyse van vloeistoffen die in de drie buizen, wordt de referentieoplossing verdund met fenol. Stoffen met een benzeenring geven kwalitatieve reactie met salpeterzuur. Als gevolg daarvan, verandert de kleur van de oplossing.

Zoals bekend, omvat gelatine een gehydrolyseerde vorm van collageen. Het eiwit niet de aromatische structuur van de aminozuren. Geen kleurverandering van het medium door reactie met een zuur.

In de derde reageerbuis een positieve reactie op eiwitten ksantoproteinovaya. Alle eiwitten met aromatische structuur, of het nu een fenylgroep of een indoolring, gezien de kleurverandering van de oplossing: conclusie kan als volgt worden opgesteld. Dit komt door de vorming van nitroverbindingen met een gele kleur.

Het uitvoeren van een kleurreactie bewijst de aanwezigheid van verschillende chemische structuren aminozuren en eiwitten. Voorbeeld gelatine blijkt dat de samenstelling aminocarbonzuur niet een fenylgroep of een cyclische structuur.

Met ksantoproteinovaya reactie kan worden verklaard door vergeling van de huid bij aanbrenging op het een sterke salpeterzuur. Dezelfde kleur zal melkschuim worden tijdens haar soortgelijke analyse.

In klinisch laboratorium praktijk wordt dit kleurstaal niet gebruikt voor de detectie van eiwit in de urine. Dit is te wijten aan de gele kleur van de urine zelf.

Ksantoproteinovaya reactiemengsel werd in toenemende mate gebruikt voor het kwantificeren van aminozuren zoals tryptofaan en tyrosine, uit verscheidene eiwitten.