Microscopische Methods in Microbiology

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Microscopisch onderzoek methoden zijn manieren om een verscheidenheid aan objecten met het gebruik van speciale apparatuur te verkennen. Het stelt ons in staat om de structuur van stoffen en organismen, waarvan de grootte is buiten de grenzen van de resolutie van het menselijk oog te overwegen. Het artikel geeft een korte analyse van de microscopische methoden.

Overzicht

используют в своей практике разные специалисты. Moderne methoden van microscopisch onderzoek met behulp van verschillende experts in hun praktijk. Onder hen zijn de virologen, cytologie, hematologie, morfologie, en anderen. De belangrijkste methoden van microscopisch onderzoek zijn bekend voor een lange tijd. De eerste is een lichte manier van kijken naar objecten. In de afgelopen jaren actief geïntroduceerd in de praktijk, en andere technologieën. . Zo is de populariteit van verworven fasecontrast, luminescente, interferentie, polarisatie, infrarood, ultraviolet, stereoscopische onderzoeksmethode. Ze zijn allemaal gebaseerd op een verscheidenheid van eigenschappen van het licht. . Daarnaast, op grote schaal gebruikt elektronenmicroscopie methoden. Deze werkwijzen maken het beeldscherm objecten met behulp van een gerichte stroom van geladen deeltjes. Opgemerkt dient te worden dat deze studie methoden worden gebruikt, niet alleen in de biologie en geneeskunde. в промышленности. Heel populaire methode van microscopisch onderzoek van metalen en legeringen in de industrie. Dit maakt het mogelijk de studie naar het gedrag van de verbindingen te beoordelen om technologieën om de kans op breuk en verhoogde sterkte te minimaliseren te produceren.

Light manieren: kenmerken

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Dergelijke microscopische methoden voor het bestuderen van micro-organismen en andere voorzieningen op basis van verschillende resolutie apparatuur. Een belangrijke factor hierbij is de richting van de bundeleigenschappen van het object zelf. Laatstgenoemde, in het bijzonder, kan transparant of opaak zijn. Overeenkomstig de eigenschappen van het object, het veranderen van de fysische eigenschappen van de lichtstroom - de helderheid en kleur als gevolg van de amplitude en golflengte, vliegtuig, fase en richting van golfvoortplanting. . Over het gebruik van deze kenmerken en het opbouwen van verschillende microscopische methoden.

specificiteit

Om de wegen van lichte voorwerpen te bestuderen, meestal gekleurd. Dit maakt het mogelijk om deze of andere eigenschappen te identificeren en te beschrijven. Het is noodzakelijk dat het weefsel is vastgesteld, omdat de kleuring zichtbaar bepaalde structuren uitsluitend in cellen gedood. In levende cellen scheiden een kleurstof in de vorm van vacuolen in het cytoplasma. Ze heeft niet schildert over de structuur. Maar met de live-objecten en kan worden onderzocht met behulp van een lichtmicroscoop. Voor dit doel, vitale manier van leren. In dergelijke gevallen een donkerveld condensor. Het is ingebed in de lichtmicroscoop.

Het bestuderen van ongeverfd objecten

Het wordt uitgevoerd door fasecontrast microscopie uitgevoerd. Deze methode berust op de verstrooiing van de bundel overeenkomstig de kenmerken van het object. Tijdens de belichting merkbare verandering in fase en golflengte. In de microscooplens aanwezig lichtdoorlatende plaat. Levende of vaste, maar niet beschilderde voorwerpen vanwege zijn transparantie, bijna niet veranderen, en de amplitude van de bundel die door hen veroorzaken slechts een verschuiving van de golf fase. Maar in dit geval, na het passeren door het voorwerp, de lichtbundel afgebogen door de plaat. Hierdoor tussen de balken, ontbrekende door het object en het aangaan van een lichte achtergrond, het golflengte verschil optreedt. Bij een zekere waarde van het visuele effect optreedt - het donker object duidelijk zichtbaar op een lichte achtergrond, of vice versa (in overeenstemming met de kenmerken van een faseplaat) zijn. Om dit verschil te verkrijgen dient ten minste 1/4 golflengte.

Anoptralny methode

Hij is een soort van fase-contrast methode. Anoptralny werkwijze omvat het gebruik van een lens met speciale platen, die alleen de kleur en helderheid van het omgevingslicht wijzigen. Dit vergroot in hoge mate de mogelijkheden van het bestuderen van niet-gekleurde levende objecten. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applied fasecontrastmicroscoop methode van onderzoek in de microbiologie, parasitologie in de studie van plantaardige en dierlijke cellen, protozoa. Bij de hematologie wordt gebruikt om te berekenen en de differentiatie van bloedcellen en beenmerg.

interferentie technieken

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Deze microscopische onderzoeksmethoden algemeen dezelfde problemen als fase contrast op te lossen. Echter, in het laatste geval, experts kunnen alleen rekening met de contouren van objecten. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. De storing microscopische onderzoeksmethoden ons in staat stellen om hun rol te bestuderen, het uitvoeren van een kwantitatieve beoordeling elementen. Dit is mogelijk door het splitsen van de lichtbundel. Één stroom door het deeltjes object en de andere - bij. In het oculair van de microscoop ze voldoen aan en interfereren. De resulterende faseverschil kan worden bepaald gewichts verschillende cellulaire structuren. Als opeenvolgende meting met de vooraf bepaalde brekingsindex instelbaar dikke gefixeerde weefsels en levende object, het eiwitgehalte daarin de concentratie vaste stoffen en water, enz. Volgens de ontvangen data specialisten kunnen membraanpermeabiliteit, enzymactiviteit, celmetabolisme indirect evalueren.

polarisatie

Het wordt uitgevoerd door middel van Nicol prisma of wazige polaroids uitgevoerd. Ze geplaatst tussen het monster en de lichtbron. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polariserende microscopie methode van onderzoek in de microbiologie stelt ons in staat om objecten met inhomogene eigenschappen te bestuderen. In isotrope structuren de voortplantingssnelheid van het licht onafhankelijk van de geselecteerde vlak. In de anisotrope systemen varieert volgens het licht georiënteerd langs de transversale of longitudinale as van het object. Indien de brekingsindexwaarde langs de structuur groter is dan langs de transversale wordt, wordt een positieve dubbelbreking. Dit is kenmerkend voor vele biologische objecten die een strikt moleculaire oriëntatie hebben gevonden. Ze zijn allemaal anisotroop. In deze categorie, in het bijzonder de myofibrils, neurofibrillen, trilharen in de trilhaarepitheel, collageenvezels, en anderen.

polarisatiewaarde

Een vergelijking van de aard van de straling en de brekingsindex anisotropie van het object maakt het mogelijk om de moleculaire structuur van de organisatie te schatten. Polarisatie methode dient als een van de histologische analyse methoden die worden gebruikt in de cytologie, enzovoort. Niet alleen beschilderde objecten kan worden bestudeerd in het licht. Polarisatie methode beschrijft om ongekleurde en gefixeerde onderzoeken - inheemse - bereidingen van weefselsecties.

fluorescerende technieken

Ze zijn gebaseerd op de eigenschappen van bepaalde objecten te geven glow in the blue-violet gedeelte van het spectrum of UV-stralen. Veel stoffen zoals eiwitten, sommige vitaminen, co-enzymen, drugs, begiftigd met een primaire (en) luminescentie. Andere objecten beginnen te gloeien door het toevoegen van een fluorochroom - speciale kleurstoffen. Deze additieven selectief diffuus of verdeeld in afzonderlijke cellulaire structuren of chemische verbindingen. Deze eigenschap was de basis van het gebruik van fluorescentiemicroscopie met histochemische en cytologisch onderzoek.

Toepassingsgebieden

Met behulp van immuno-fluorescentie-experts detecteren virale antigenen en hun concentratie aangepast worden geïdentificeerd virussen anti lichamen en antigenen, hormonen, verscheidene metabole producten en ga zo maar door. In dit opzicht is de diagnose van herpes, bof, hepatitis B, influenza en andere infecties met behulp van fluorescente methoden van materiaalonderzoek. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Microscopische immuno-fluorescentie werkwijze detecteert tumor maligniteit bepalen ischemische gebieden van het hart in het begin van een hartaanval, enzovoort.

Het gebruik van ultraviolet

Het is gebaseerd op het vermogen van een aantal stoffen in levende cellen of micro-organismen gefixeerd, maar niet gekleurd transparant onder zichtbaar licht stoffen absorbeert UV-straling met een specifieke golflengte. Dit geldt met name voor hoogmoleculaire verbindingen. Deze omvatten eiwitten, aromatische zuren (methylalanine, tryptofaan, tyrosine, enz.), Nucleïnezuren en purinebasen piramidinovye enzovoort. UV microscopie maakt het mogelijk om de locatie en het aantal van deze verbindingen te specificeren. In de studie van levende wezens kunnen professionals de veranderingen in hun metabolische processen te observeren.

bovendien

Infrarood microscopie gebruikt in de studie worden ondoorzichtig voor licht en ultraviolette stralen door absorptie van de objecten stroomt structuren waarvan de golflengte 750-1200 nm. Om deze methode is er geen noodzaak voor een pre-bloot de drugs aan chemische behandeling toe te passen. Typisch wordt de IR methode antropologie, zoölogie en andere sciences. Zoals voor de geneeskunde, is deze methode vooral gebruikt in de oogheelkunde en Neuromorphology. De studie-dimensionale objecten met behulp van een stereoscopische microscoop. hardware-ontwerp maakt het bewaken van de linker- en rechteroog onder een andere hoek. Ondoorzichtige voorwerpen onderzocht bij betrekkelijk lage vergroting (120 keer hooguit). Stereoscopische methoden worden gebruikt in microchirurgie, Pathomorphology in de forensische geneeskunde.

elektronenmicroscopie

Het wordt gebruikt om de structuur van cellen en weefsels te bestuderen in de macromoleculaire en subcellulaire niveaus. Elektronenmicroscopie liet ons toe om een kwalitatieve sprong voorwaarts op het gebied van onderzoek. Deze methode wordt algemeen gebruikt in de biochemie, oncologie, virologie, morfologie, immunologie, genetica, en andere gebieden. Aanzienlijke verbetering van de resolutie door de apparatuurcapaciteit stroom van elektronen die door het elektromagnetische veld vacuum passen. De laatste, op zijn beurt, maakt speciale lenzen. Elektronen kunnen door de structuur van het object kan worden verzonden of gereflecteerd door ze met afwijkingen van verschillende hoeken. Het resultaat wordt weergegeven op het fluorescentiescherm van de inrichting. Als transmissiemicroscopie bovenaanzicht verkregen wanneer respectievelijk aftasten omringen.

voorwaarden

Het is vermeldenswaard dat voor de pas elektronisch microscopisch onderzoek, het voorwerp wordt onderworpen aan een speciale opleiding. Met name het gebruik van fysische of chemische fixatie van weefsels en organismen. Sectionele biopsiemateriaal en bovendien, ontwaterd, wordt ingebed in epoxyhars, geslepen glas of diamantmessen op ultradunne secties. Dan hun contrast en studie. De scanning microscoop onderzoekt het oppervlak van voorwerpen. Om dit te doen, bespoten ze een speciale stof in de vacuümkamer.